基于小分子筛选的嗅上皮类器官培养体系的建立

嗅上皮接收和传导气味信号是嗅觉系统的重要组成部分。嗅上皮的损伤在通常情况下可自发恢复,但特定疾病或衰老造成的嗅上皮损伤会引起嗅觉功能减退和嗅觉障碍。嗅上皮主要由基底细胞、支持细胞以及嗅感觉神经元组成。为了在体外建立包含多种细胞类型的嗅上皮类器官,本研究采用3D细胞培养技术,通过筛选小分子药物,构建了包含多种细胞类型的嗅上皮类器官模型,包含水平基底样细胞、球形基底样细胞、支持样细胞和嗅感觉神经元样细胞多种细胞类型。类器官培养体系中多种生长因子和小分子化合物在细胞增殖速度、细胞组成以及不同细胞类型标志基因的表达水平等方面对类器官产生影响。Wnt信号通路激活剂CHIR-99021能够提高嗅上皮类器官的成克隆率和增殖速度且有利于提高嗅上皮类器官中嗅感觉神经元样细胞标志基因的表达水平;培养体系的任一因子均能提高类器官中cKit阳性的球形基底样细胞克隆比例;表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和维生素C均有利于类器官中水平基底样细胞标志基因的表达。本研究建立的嗅上皮类器官系统模拟了嗅上皮干细胞分化产生多种嗅上皮细胞类型的过程,为研究嗅上皮组织损伤再生、嗅觉障碍病理...     

胶原酶消化法分离制备罗非鱼和中华鳖的胰岛细胞及其生物活性

目的探讨罗非鱼、中华鳖胰岛细胞分离提取的方法及对比两者的生物学活性差异。方法采用胶原酶消化分离罗非鱼、中华鳖胰岛细胞,光镜下观察其形态结构。在体外用不同浓度的葡萄糖刺激胰岛细胞,测定其生物学活性。结果罗非鱼、中华鳖胰岛细胞在体外对不同浓度的葡萄糖刺激具有明确的生物学反应,并随着葡萄糖浓度的增加胰岛素的产生也相应增加。结论采用胶原酶消化分离罗非鱼、中华鳖胰岛细胞的方法可行,胰岛细胞在体外对不同浓度的葡萄糖刺激产生胰岛素并具有正相关,其为鱼纲、爬行纲与哺乳纲动物之间的胰岛细胞移植奠定了实验基础。     

线粒体钾通道Kcna3基因敲除小鼠初步制备

目的 为观察线粒体钾通道在缺血再灌注(I/R)心肌损伤中的作用,探讨其和心衰的关系,制备基因敲除小鼠模型以探讨钾通道单分子作用.方法 用BAC载体制备同源重组载体,对129小鼠胚胎干细胞(ES)打靶筛选后,显微注射至C57 BL/6J小鼠囊胚获得嵌合小鼠.经尾基因组DNA PCR鉴定和测序,鉴别杂合子小鼠.结果 在40只灰色小鼠中初步鉴定出Kcna3+/-基因型F1小鼠8只.结论 在国内首先用ES同源重组基因打靶方法,成功育成Kcna3基因敲除鼠杂合子,为下一步获得纯合子鼠奠定了基础.对进一步用钾离子通道病模型研究心肌保护病理生理机制和药物筛选具重要意义.     

肺泡巨噬细胞表面甘露糖受体在免疫抑制大鼠肺隐球菌感染中的实验研究

目的探讨免疫抑制大鼠肺泡巨噬细胞(AM)表面表达的甘露糖受体在AM吞噬隐球菌过程中的作用。方法建立免疫抑制(FK506)大鼠模型,流式细胞法检测AM表面甘露糖受体mRNA的表达量,观察免疫缺陷对AM表面甘露糖受体表达的影响。将实验(FK506)组与对照(正常)组大鼠的AM分别与荧光标记的新生隐球菌共培养,观察AM对隐球菌的吞噬情况。结果成功建立免疫抑制大鼠模型,免疫抑制大鼠表达的甘露糖受体与正常大鼠无统计学差别,对隐球菌的吞噬亦无差别。结论免疫抑制状态不是影响甘露糖受体表达的主要因素。     

氟喹诺酮类抗生素及耐药基因污染控制的研究进展北大核心CSCD

氟喹诺酮类抗生素属于喹诺酮类抗生素,是一类人畜通用的抗生素。近年来,被广泛应用于人类和畜牧、水产等养殖业领域,然而其大量使用,造成在环境中的不断残留和累积,给自然环境和人类健康造成了较大威胁。现有研究表明,微生物降解是有效去除氟喹诺酮类抗生素残留污染的有效方法之一。本文总结和介绍了近年来氟喹诺酮类抗生素微生物降解单株菌和混合菌群、微生物降解酶、降解途径以及微生物降解氟喹诺酮类抗生素的实际应用,并对目前氟喹诺酮类抗生素微生物降解研究中存在的问题进行了分析,以及对未来氟喹诺酮类抗生素微生物降解研究的重点进行了探讨,以期为后续的研究提供参考。     

N-豆蔻酰化转移酶在乳腺癌组织中的表达及作用研究

摘要 目的：研究N-豆蔻酰化转移酶1（NMT1）和2（NMT2）在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生物学作用。方法：ELISA检测NMT1和NMT2在40例乳腺癌组织中含量,免疫组化证实其表达。小RNA干扰技术敲减乳腺癌细胞MCF-7及BT-474中NMT1和NMT2表达水平。CCK-8及Transwell小室穿膜试验检测NMT1和NMT2敲减前后细胞增殖及转移能力变化。结果：NMT1及NMT2在发生淋巴结转移、III/IV期患者的乳腺癌组织中表达显著升高（P<0.01）。利用CCK-8检测发现NMT1或NMT2敲减48h后乳腺癌细胞BT-474、MCF-7增殖活性较对照组细胞显著减弱（P<0.0001）。Transwell小室穿膜试验检测发现,NMT1或NMT2敲减组细胞较对照组细胞,穿膜细胞数显著减低（P<0.01）。结论：NMT1及NMT2在乳腺癌的发生、发展过程中起到关键作用,敲减NMT1及NMT2可削弱乳腺癌细胞增殖和转移能力。靶向抑制NMT1及NMT2有望成为干预乳腺癌的重要分子靶点。     

顺尔宁联合喘可治佐治小儿毛细支气管炎的临床疗效观察

目的：观察顺尔宁联合喘可治佐治小儿毛细支气管炎的临床疗效及其安全性。方法：选取2010年9月～2012年3月在我院儿科住院的70例毛细支气管炎患儿作为观察对象,按入院先后顺序随机分为治疗组和对照组,每组35例。两组均常规给予抗感染、解痉平喘、吸氧、镇静等综合治疗,治疗组在常规治疗的基础上加顺尔宁（孟鲁司特钠咀嚼片）口服,每天4 mg,每晚1次,以及喘可治注射液口服,每次半支,2次/日。治疗7天后观察和比较两组患儿的临床疗效,并对所有病例门诊随访3个月,观察各组患儿在此期间喘息再次发作的情况。结果：治疗7天后,治疗组的总有效率为97.1%,对照组的有效率为80.0%,两组间有显著性差异（X2=7.83,P〈0.05）。治疗组症状体征平均持续时间均较对照组明显缩短,差异有统计学意义（P〈0.05）。随访3个月内治疗组喘息反复发作的平均次数显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组均未见严重不良反应。结论：顺尔宁联合喘可治佐治毛细支气管炎临床疗效显著,并能缩短住院时间,由于顺尔宁可控制毛细支气管炎后的气道慢性炎症,喘可治注射液可增强呼吸道抵抗能力、减少呼吸道反复感染,对毛细支气管炎后喘息的反复发作有预防作用。     

靶向金纳米棒对隐球菌活性影响的体外实验研究

目的：设计对隐球菌荚膜特异性标记的靶向金纳米棒,研究靶向金纳米棒的体外光热作用对隐球菌活性的影响。方法晶种生长法制备金纳米棒,偶联隐球菌荚膜抗体,检测表征,与隐球菌体外孵育,近红外激光照射,检测隐球菌活性变化。结果成功制备与荚膜抗体偶联的金纳米棒,体外近红外照射后,隐球菌活性较未偶联抗体的金纳米棒组显著降低。结论靶向性金纳米棒显著增强了近红外激光对隐球菌的光热效应,可用于治疗隐球菌感染的新尝试。     

肿瘤免疫治疗专题报告 ——遇上最好的时代

肿瘤免疫治疗被称为继手术、放疗、化疗后第 4 种疗法,其可激活特异性、重要的免疫细胞,直接靶向性攻击癌症细胞,具有较高 的疗效和安全性,是目前全球肿瘤治疗研究的热点。报告采用文献调研、数据库检索、数据统计与分析等定性定量研究方法,从市场预测、 发展历程、国内外企业布局情况等方面对肿瘤免疫治疗药物领域进行多角度、多层次的分析,旨在为相关企业明确发展方向、确定产品研 发思路及制定市场策略提供线索和参考。     

大鼠异位工作型心脏移植模型的建立

目的 建立大鼠腹腔异位工作型心脏移植动物模型.方法 Wistar大鼠30只,将供心主肺动脉与左房吻合,再将供心移植到受体腹部,将升主动脉与供心腹主动脉端侧吻合,使得左心房获得前负荷,成为工作型心脏.结果 成功建立大鼠腹腔异位工作型心脏移植模型,15例成功11例,手术成功率为73%.手术平均时间为(38.8±5.7)min.移植心脏获得长期存活,在28 d后通过超声观察可见供体心脏工作正常.结论 手术的关键是提高供心的摘取技术及受体的血管吻合技术,同时术后给与供心适当的按摩辅助也非常必要.此模型可以更好的用于移植免疫学的研究.